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农业科学的发展依赖于高效、精准的检测技术,以优化作物生长环境、提高种子质量、改良农作物品种。传统的农业检测方法,如光学显微镜、石蜡切片、激光共聚焦显微镜等,往往局限于二维成像,且检测过程耗时费力,难以全面呈现作物的内部结构。
显微CT(Micro-CT)技术作为一种高分辨率、非破坏性的三维成像手段,在农业研究中展现出巨大的潜力。该技术利用 X 射线穿透样品并获取各个角度的投影数据,通过计算机重建获得三维结构信息,为作物内部结构、种子质量检测、根系研究、害虫检测等提供了前所未有的分析能力。
Chapter.1 为什么农业研究需要显微CT?
01 显微CT的基本原理
显微 CT 技术的核心是 X 射线断层扫描成像,它通过以下几个步骤获取三维结构信息:
X 射线投射:X 射线穿透样品并被不同密度的组织吸收,形成不同的衰减信息。
多角度扫描:样品在旋转台上进行 360° 旋转,采集多个角度的投影图像。
图像重建:利用数学算法(如滤波反投影法、代数重建法)将二维投影数据计算为三维体数据。
三维可视化:生成高分辨率的三维图像,可进行体积、密度、孔隙率等定量分析。
02 显微CT的技术优势
相比传统农业检测手段,显微 CT 技术具备以下优势:
无损检测:可在不破坏样品的前提下获取内部结构信息,避免样品处理过程中可能产生的误差。
高分辨率成像:可达到微米级甚至纳米级分辨率,能够识别种子胚胎、根系分布等精细结构。
多层次信息获取:
1.结构信息:植物的茎秆维管束、叶片结构、果实和种子内部结构等
2.密度信息:作物内部的密度信息,用于评估种子质量
3.三维模型:有限元分析、3D打印等
Chapter.2 显微CT在农业研究中的应用
应用一 作物内部结构分析
显微 CT 技术能够无损地获取植物内部结构的高分辨率三维图像,这对于研究植物的茎秆维管束、叶片结构、果实和种子内部结构等具有重要意义。通过显微 CT 技术,研究人员可以详细观察植物内部结构的微观特征,从而更好地理解植物的生长、发育和适应性。
✦ 植物茎秆维管束研究
显微 CT 技术可以精确地揭示作物茎秆中的维管束分布、形态和结构特征,为作物的遗传解析、抗倒伏性评估、高通量表型数据获取以及数据库构建等方面提供了强有力的工具。使用 Neoscan N80 高分辨显微 CT 以 5μm 像素大小提取玉米维管束网络, 获取三维模型,模拟水分运输和力学支撑。
使用 Neoscan N80 高分辨显微 CT 以 1.5μm 像素大小扫描花药,内部结构清晰可见。
应用二 种子质量检测与筛选
01 水稻种子垩白率检测
水稻种子的垩白现象(指胚乳部分出现白色不透明区域)会影响大米的品质及口感。文献【1】研究表明,显微 CT 可对水稻种子进行三维扫描,计算垩白率和种子颗粒尺寸,从而提高水稻育种效率。
图片源于文献【1】。稻米垩白的形状和位置。白腹(X220)、白核(X226)、白全(香早仙)和白背(X191)垩白精米;分别具有白腹(b)、白核(c)、白全(d)和白背(e)垩白的精米的横截面图像、重建的3D稻米图像和重建的3D垩白图像。红色箭头所示的深色区域代表稻米垩白的位置。
图片源于文献【1】。利用微型CT三维重建结合Chalkines2.0软件自动计算垩白率和稻米粒径。a在Chalkiness 2.0软件中导入珍汕97B精米的扫描图像,对稻米颗粒和垩白度进行自动区域化;b自动计算垩白度相关参数,并将测试报告导出到Excel格式文件中;c基于显微CT三维重建结合Chalkines 2.0软件自动计算垩白率的图形概述。d重建最大截面附近的20个截面,并生成平面图像;e将平面图像导入Chalkines 2.0进行粒度评估;f将定量结果导出到Excel文件中。这些值表示相对长度和宽度。
02 大米内部结构分析
使用 Neoscan N80 高分辨显微 CT 以 1.2μm 像素大小扫描大米,内部胚、胚芽、胚根、胚心、胚乳、盾片、谷壳等结构清晰可见。一次扫描多相数据,内部细节尽收眼底。
03 玉米种子机械损伤评估
在农业生产和物流运输过程中,种子容易受到机械损伤。显微 CT 可用于评估机械损伤、昆虫造成的损伤、胚异常以及由生物、非生物制剂引起的种子的其他形态变化。研究表明,受到损伤的种子,其发芽率和生长质量明显下降【2】。
图片源于文献【2】。通过显微 CT 扫描玉米种子,机械损伤的种子产生的幼苗长度比未损伤种子平均短 24%,干物质量比未损伤种子低 65%。研究发现。胚乳冠状面受损面积 与 苗长短 和 干物质量 直接相关。
使用 NEOSCAN 高分辨率显微CT 以 8μm 像素大小扫描干燥玉米粒,可清晰展示玉米种子内部子叶、胚芽、胚轴、胚根、 胚乳、种皮结构,帮助评估种子质量。
04 番茄种子萌发能力预测
利用显微 CT 技术可以分析番茄种子的内部结构,如胚乳、胚根及孔隙分布,可用于预测其发芽率和生长能力。研究表明,种子内部孔隙率较高(自由空间增加)通常与较低的萌发率相关【3】。
图片源于文献【3】。图片展示了如何通过3D形态学来预测番茄种子的发芽潜力以及不同发芽状态的种子图像。A)严重变形的胚胎,B) 轻微变形的胚胎,C) 严重缩小的胚乳,D) 侧向弯曲的子叶,即垂直方向 种子横切面,E)反折子叶,即种子内的一个或两个子叶急剧反折,F)胚乳中的孔,G)子叶中的裂缝,N)正常种子结构。发芽测试结果示例:正常幼苗、异常幼苗、死亡种子、未发芽种子。
使用 Neoscan N80 高分辨显微CT以 1.8μm 像素大小扫描番茄种子表面及内部结构,二维和三维结构参数可测量,表皮、胚、胚乳、内部孔隙裂缝的体积分数可计算并能通过体绘制直观展示。
应用三 植物根系结构分析:无需洗根,原位表征
植物根系是植物获得水分和养分的主要机制。通过表征根系,人们可以了解植物表型,以帮助培育具有更有效水分和养分捕获的植物。传统的根系表征可能很繁琐,包括需要从土壤中挖取植物,并清洗根系。而显微 CT 技术来表征根系结构,无需进行清洗,可以进行原位表征根系结构。
使用 Neoscan N80 高分辨显微 CT 以 20μm 像素大小扫描水稻根系,分析根系的分布、直径、分叉结构及体积密度,帮助育种专家筛选高效吸水和耐旱品种。
图片源于文献【4】。(A) 番茄根木质部结构(红色)的形态;可能会发生严重的栓塞,影响水的运输。(B) 番茄叶柄中脉管系统的细胞结构影响水分和叶子的同化通量。(C) 叶子结构决定 CO2 和 H2O 的运输。(D) 番茄种子结构影响种子萌发。(E) 番茄细胞和细胞间隙的形状和大小影响成熟过程中的呼吸气体交换。对于每个图 (A–E),给出了原始 X 射线显微 CT 横截面以及渲染的 3D 图像。
应用四 病虫害防治
显微 CT 技术可以帮助研究人员在不破坏样品的情况下,用于检测储粮害虫、果实内部害虫及植株内寄生虫的生长情况,帮助制定精准防治措施。
咖啡果小蠹是一种影响咖啡豆质量的害虫,使用 Neoscan N80 高分辨显微 CT 以 980 nm像素大小扫描,可无损成像其生长位置、取食模式及侵害程度,为咖啡种植业提供有效的虫害管理方案。
Chapter.3 总结与展望
显微 CT 技术作为一种先进的三维成像技术,在农业领域的应用前景广阔。它为农业生产、作物改良和植物科学研究提供了一种新的视角和方法。随着技术的不断发展和完善,显微 CT 技术将在农业领域发挥越来越重要的作用。
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